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猪传染性胃肠炎灭活细胞疫苗

发布于 2014-09-17 来源 网络 浏览 299
猪传染性胃肠炎(TGE)是急性高度传染性疾病,在很多国家广泛流行,并给养猪业造成很大经济损失。TGE主要侵害2周龄以下的仔猪,死亡率可达100%.本病对大型养猪场更具危害性。虽然研究很多,但现在TGE的特异性预防还未彻底解决。这与仔猪生后几天就感染此病,不能建立主动免疫,而只靠母乳抗体而获得被动免疫有关。
本工作目的是研制新的应用方便、免疫效力优于其他同类疫苗的灭活细胞苗。灭活苗毒株是2004年在暴发TGE猪场分离到并适应细胞培养,且呈现致细胞病变作用的TB株。滴度7.0~7.7lgTCID50/mL,并能中和特异性血清。病毒在单层细胞中繁殖,感染活性不低于7.0lgTCID50/mL,用免疫酶方法检测病毒抗原的最终浓度在1:4以上。在培养细胞中连续传3代,检测灭活程度。制备疫苗用2种佐剂,即油包水乳化苗和氢氧化铝吸附苗。用家兔检测疫苗的无菌性、反应性和抗原性。经检验所有批次疫苗均无菌、无毒,在兔体1次免疫2mL,经21d后产生1:64以上的特异性中和抗体。乳化苗在2~8℃下保存12个月,其物理性状不变。
在4个流行TGE猪场进行疫苗试验。在怀孕75~80d和90~100d对基础母猪和后备母猪进行2次肌肉注射,乳化苗剂量3.0mL,吸附苗5.0mL。根据仔猪存活率、平均重量和平均日增重评价疫苗的效果。用中和试验检测母猪产仔日的初乳抗体。用免疫酶试验检测带有腹泻症状新生仔猪粪便中特异性抗原或用多聚酶链反应检查TGE病毒基因。
在No1猪场长时间(5年以上)流行TGE,用未吃母乳仔猪的肠毒制备灭活苗和活苗预防本病。在2组试验中,用灭活细胞苗共免疫注射213头怀孕母猪,共产仔1780头(每头母猪平均产仔8.8头),离乳时仔猪存活率93%。在免疫效力上乳化苗和吸附苗没有本质区别。用肠毒疫苗做对照,免疫注射159头母猪,共产仔1410头(每头母猪平均产仔8.8头),存活率82%。
试验组在断乳时的仔猪存活率、日增重和平均重量均高于对照组,见下表。





组别


试验疫苗


免疫母猪数量


产仔数


断乳时仔猪存活率%


断乳时仔猪平均重量kg


仔猪平均日增重g


母猪产仔日初乳病毒中和抗体效价




1


乳化苗
吸附苗
肠毒灭活苗(对照)


59
54
52


466
458
467


97.4
98.4
94.4


8.5
8.0
8.2


240
224
216


1:1280-1:5120
1:1280-1:5120
1:1280-1:5120




2


乳化苗
肠毒灭活苗(对照)


100
107


856
843


88.7
84.7


未测
未测


193
199


1:1280-1:5120
1:1280-1:5120




在No2猪场TGE流行在3年以上。用肠毒灭活苗做免疫对照。用灭活细胞苗共免疫160头母猪,其中乳化苗100头,氢氧化铝吸附苗60头。试验结果表明,乳化苗组和吸附苗组的仔猪存活率分别为87%和76%,对照组81%.。乳化苗组和吸附苗组母猪初乳的病毒中和抗体效价为1:1280~1:2560,对照组为1:640~1;1280.。
在No3猪场最近3年有TGE流行,系统应用TP-1苗预防本病。在试验中将基础母猪和后备母猪分3组分别进行乳化苗、氢氧化铝吸附苗和TP-1苗(对照)免疫注射。乳化苗注射58头基础母猪和30头后备母猪,吸附苗注射60头基础母猪和28头后备母猪,TP-1苗注射63头基础母猪和20头后备母猪。断乳时仔猪存活率各组相应为91.9%、68%和74%。母猪初乳的中和抗体分别为1:1280~1:2560,1:640~1;1280,对照组为1:320~1:1280。
在No4猪场TGE呈慢性流行,用TP-1疫苗预防本病。在哺乳期仔猪的死亡率降至10%~15%。用TGE乳化苗注射60头母猪,出租61头,死亡率为4%~5%.。基础母猪和后备母猪所产仔猪的存活率分别为96%和95%.。母猪初乳病毒中和抗体的效价为1:640~1:5120,这与新生仔猪高的保护率相平行。
试验结果表明,灭活细胞苗是安全高效的。按新生仔猪的保护效力和母猪初乳中和抗体的效价,TGE灭活细胞苗的免疫原性均高于已知其他同类疫苗。在一些试验中乳化苗的免疫原性明显高于吸附苗和肠毒苗。
在流行TGE的4个猪场用灭活细胞苗免疫母猪所产仔猪在离乳时的死亡率平均是8.5%.。根据国外资料,1986~1996年间,在美国、加拿大、荷兰、英国、法国和澳大利亚等国哺乳期仔猪死亡率为11.5%~18.6%.。
结论:用TB株培育的强毒制备TGE灭活细胞苗是安全的、反应轻微的疫苗,免疫原性优于所有已知同类疫苗。在产仔日检测被免疫母猪初乳特异的病毒中和抗体水平实验室评价免疫性的可靠方法。